分子生物学实验方法
最后发布时间:2020-12-04 11:14:17
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印迹技术
- Southern blot (DNA印记):用DNA探针探测未知的DNA分子。
- Northern blot (RNA印记):用DNA探针探测未知RNA分子。
- Western blot (免疫印记):用抗体作为探针探测未知的DNA分子。
蛋白质相对分子质量的测定
沉降速度法
凝胶过滤法
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)
与PAGE相比SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,使肽链带净负电荷,让蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关。
- 原理:蛋白质在 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的电泳速度近取决于蛋白质相对分子质量的大小。
- 方法:用标准蛋白质相对分子质量的对数与相应的相对迁移率作图,得到标准曲线。根据样品迁移率,从标准曲线查出相对分子质量。
- 相对迁移率=样品迁移距离/指示染料迁移距离