印迹技术
蛋白质相对分子质量的测定
沉降速度法
凝胶过滤法
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)
印迹技术
Southern blot (DNA印记):用DNA探针探测未知的DNA分子。
Northern blot (RNA印记):用DNA探针探测未知RNA分子。
Western blot (免疫印记):用抗体作为探针探测未知的DNA分子。
蛋白质相对分子质量的测定
沉降速度法
凝胶过滤法
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)
与PAGE相比SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,使肽链带净负电荷,让蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关。
原理:蛋白质在
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
中的电泳速度近取决于
蛋白质相对分子质量的大小
。
方法:用
标准蛋白质相对分子质量的对数
与相应的
相对迁移率
作图,得到标准曲线。根据样品迁移率,从标准曲线查出相对分子质量。
相对迁移率=样品迁移距离/指示染料迁移距离